ক্রোমোটোগ্রাফি (Chromatography)

ক্রোমোটোগ্রাফির অর্থ হল বর্ণচিত্ৰণ । রুশ বিজ্ঞানী সোয়েট উদ্ভিদ থেকে ক্লোরোফিল নামক রঙিন যৌগ পৃথক জন্য এ পদ্ধতি উদ্ভাবন করেন। যে বিশ্লেষণ মূলক পদ্ধতিতে জৈব যৌগের দুই বা ততোধিক উপাদানের কোনো মিশ্রণ অপর একটি সচল মাধ্যমকে উক্ত স্থির মাধ্যমের সংস্পর্শে প্রবাহিত করে মিশ্রণের উপাদানগুলোকে অধিশোষণ মাত্রা কিংবা বন্টন সহগের উপর ভিত্তি করে এদেরকে বিভিন্ন স্তরে পৃথক করার পদ্ধতিকে ক্রোমোটাগ্রাফি বলে। ক্রোমোটাগ্রাফিতে দুটি মাধ্যমে থাকে

১. স্থির মাধ্যম

২. সচল মাধ্যম।

সাধারণত তরল বা গ্যাসীয় পদার্থ সচল মাধ্যম হিসাবে এবং কঠিন পদার্থকে স্থির মাধ্যম হিসাবে ব্যবহার করা হয়। প্রথমে মিশ্রণের উপাদানগুলোকে একটি উপযুক্ত দ্রাবকে দ্রবীভত করা হয় এবং স্থির মাধ্যমের উপর প্রয়োজন মতো যোগ করা হয়। অতঃপর মাধ্যমকে স্থির মাধ্যমের সংস্পর্শে প্রবাহিত করা হয়। স্থির মাধ্যম যদি কঠিন পদার্থ হয় তাহলে অধিশোষণ মাত্রার উপর ভিত্তি উপাদানগুলো বিভিন্ন স্তরে পৃথক হয়ে যায়। 

কোনো উপাদান স্থির মাধ্যমের অধিশোষক দ্বারা কতটা অধিশোষিত হবে তা নির্ভর করে উপাদানের গঠন প্রকৃতির উপর। উপাদানটি যত বেশি পোলার হবে এর অধিশোষণ মাত্রাও তত বেশি হবে।

যেমন: -COOH>-OH>-NH_2>-CHO>-CO->=C=C=

যদি স্থির মাধ্যম তরল পদার্থ হয় তখন এর মধ্যে সচল মিশ্রণের উপাদানগুলোর বন্টন সহগের উপর ভিত্তি করে উপাদানগুলো বিভিন্ন স্তরে ভাগ হয়ে যায়।

ক্রোমোটোগ্রাফিকে দুই ভাগে ভাগ করা যায়।

(ক) অধিশোষণ ক্রোমোটাগ্রাফি: (Adsorption chromatography)

১। কলাম ক্রোমোটোগ্রাফি (column chromatography)

২। পাতলাস্তর ক্রোমোটোগ্রাফি (thin layer chromatography)

(খ) বন্টন বা বিভাজন ক্রোমোটোগ্রাফি : (partition chromatography)

১। পেপার ক্রোমোটোগ্রাফি (paper chromatography)

২। গ্যাস ক্রোমোটোগ্রাফি (gas chromatography)

R_f বা Retardation Factor Value

R হলো রক্ষণ বা ধারণ গুণাঙ্ক। সাধারণত TLC এবং পেপার ক্রোমোটোগ্রাফিতে R_f এর মান নির্ণয়ের মাধ্যমে কোনো মিশ্রণের উপাদানগুলোকে শনাক্ত করা হয়। একটি নির্দিষ্ট সময় পর ভিত্তি রেখা থেকে কোনো একটি উপাদান কর্তৃক অতিক্রান্ত দূরত্ব এবং দ্রাবক কর্তৃক অতিক্রান্ত দূরত্বের অনুপাতকে ঐ উপাদানের R_f বলে।

সুতরাং,

R_f=\frac{কোনো\; উপাদান\; কর্তৃক\; অতিক্রান্ত\; দূরত্ব}{দ্রাবক\; কর্তৃক\; অতিক্রান্ত\; দূরত্ব}

R_f এর বৈশিষ্ট্য:

১। এটি একটি আনুপাতিক রাশি হওয়ায় এর কোনো একক নেই।

২। R_f এর মান সবসময় 1 থেকে কম হয়।

৩। দ্রাবকের প্রকৃতির উপর R_f এর মান নির্ভরশীল।

A উপাদানের R_f=\frac{a}{c}

এবং B উপাদানের R_f=\frac{b}{c}